Phau Ntawv Qhia Txog Kev Tshawb Fawb Lub Caij Ntuj Sov: Thaum Lub Caij Ntuj Sov Kub 40°C Sib Tw Nrog Kev Sim Txog Molecular

Tsis ntev los no, qhov kub thiab txias tau txuas ntxiv mus thoob plaws ntau lub tebchaws Suav teb. Thaum Lub Xya Hli 24, Shandong Provincial Meteorological Observatory tau tshaj tawm cov lus ceeb toom kub thiab txias daj, kwv yees tias qhov kub thiab txias "zoo li chav sauna" yuav txog 35-37 ° C (111-133 ° F) thiab 80% av noo rau plaub hnub tom ntej hauv thaj chaw sab hauv av. Qhov kub thiab txias hauv cov chaw xws li Turpan, Xinjiang, tab tom yuav txog 48 ° C (111-133 ° F). Wuhan thiab Xiaogan, Hubei, nyob hauv qab kev ceeb toom txiv kab ntxwv, nrog rau qhov kub thiab txias tshaj 37 ° C hauv qee thaj chaw. Hauv qhov kub hnyiab no, lub ntiaj teb me me hauv qab ntawm cov pipettes tab tom ntsib kev cuam tshuam tsis tshua muaj - kev ruaj khov ntawm cov nucleic acids, kev ua haujlwm ntawm cov enzymes, thiab lub cev ntawm cov reagents raug cuam tshuam los ntawm cua sov.

Kev rho tawm nucleic acid tau dhau los ua kev sib tw nrog lub sijhawm. Thaum qhov kub sab nraum zoov tshaj 40 ° C, txawm tias muaj lub tshuab cua txias qhib, qhov kub ntawm lub rooj ua haujlwm feem ntau nyob saum 28 ° C. Lub sijhawm no, cov qauv RNA uas tso rau hauv qhov qhib yuav lwj sai dua ob npaug ntawm lub caij nplooj ntoo hlav thiab lub caij nplooj zeeg. Hauv kev rho tawm cov hlaws dai sib nqus, cov tshuaj buffer tau saturated hauv zos vim yog kev ua kom sai ntawm cov kuab tshuaj, thiab cov siv lead ua tau yooj yim precipitated. Cov siv lead ua no yuav ua rau muaj kev hloov pauv loj hauv kev ua haujlwm ntawm kev ntes nucleic acid. Kev ua kom sov ntawm cov kuab tshuaj organic nce ntxiv tib lub sijhawm. Ntawm 30 ° C, qhov ntau ntawm chloroform volatilization nce 40% piv rau 25 ° C. Thaum lub sijhawm ua haujlwm, nws yog qhov tsim nyog los xyuas kom meej tias qhov cua ceev hauv lub hood fume yog 0.5 m / s, thiab siv cov hnab looj tes nitrile kom tswj tau qhov ua tau zoo ntawm kev tiv thaiv.

Cov kev sim PCR ntsib teeb meem kub ntxhov ntau dua. Cov tshuaj reagents xws li Taq enzyme thiab reverse transcriptase rhiab heev rau qhov kub hloov pauv sai sai. Kev sib sau ua ke ntawm phab ntsa raj tom qab tshem tawm ntawm lub tub yees -20 ° C tuaj yeem ua rau poob ntau dua 15% ntawm cov enzyme yog tias nws nkag mus rau hauv lub kaw lus tshuaj tiv thaiv. Cov tshuaj dNTP kuj tseem tuaj yeem qhia txog kev puas tsuaj tom qab tsuas yog 5 feeb ntawm kev raug rau qhov kub hauv chav (> 30 ° C). Kev ua haujlwm ntawm cov cuab yeej kuj raug cuam tshuam los ntawm qhov kub siab. Thaum qhov kub hauv chav kuaj yog > 35 ° C thiab qhov kub ntawm PCR tsis txaus (<50 cm ntawm phab ntsa), qhov sib txawv ntawm qhov kub sab hauv tuaj yeem ncav cuag ntau txog 0.8 ° C. Qhov kev hloov pauv no tuaj yeem ua rau qhov ua haujlwm ntawm qhov loj ntawm ntug ntawm lub phaj 96-qhov poob ntau dua 40%. Cov lim plua plav yuav tsum tau ntxuav tsis tu ncua (kev sib sau ua ke ntawm plua plav txo qhov ua haujlwm ntawm kev kub los ntawm 50%), thiab yuav tsum zam kev cua txias ncaj qha. Ntxiv mus, thaum ua cov kev sim PCR thaum hmo ntuj, tsis txhob siv cov cuab yeej PCR ua "lub tub yees ua ntej" los khaws cov qauv. Khaws cia rau ntawm 4°C ntau tshaj 2 teev tuaj yeem ua rau muaj dej noo tom qab lub hau kub kaw, ua rau lub kaw lus teb tsis muaj zog thiab ua rau cov hlau ntawm lub cuab yeej xeb.

Thaum ntsib cov lus ceeb toom txog qhov kub thiab txias tas li, cov chaw kuaj molecular kuj yuav tsum ua lub tswb ceeb toom. Cov qauv RNA muaj nqis yuav tsum khaws cia rau tom qab ntawm lub tub yees -80 ° C, nrog rau kev nkag mus rau lub sijhawm kub thiab txias. Kev qhib lub qhov rooj ntawm lub tub yees -20 ° C ntau dua tsib zaug hauv ib hnub yuav ua rau qhov kub thiab txias hloov pauv ntau dua. Cov khoom siv tsim cua sov siab xav tau tsawg kawg 50 cm ntawm qhov chaw tso cua sov rau ob sab thiab sab nraub qaum. Ntxiv mus, nws raug pom zoo kom rov tsim kho lub sijhawm sim: 7:00-10:00 AM rau kev ua haujlwm kub xws li RNA rho tawm thiab qPCR loading; 1:00-4:00 PM rau kev ua haujlwm tsis yog kev sim xws li kev tshuaj xyuas cov ntaub ntawv. Txoj kev no tuaj yeem tiv thaiv qhov kub siab tshaj plaws los ntawm kev cuam tshuam nrog cov kauj ruam tseem ceeb.

Kev sim molecular thaum lub caij ntuj sov yog kev sim ntawm ob qho tib si kev siv tshuab thiab kev ua siab ntev. Nyob rau hauv lub hnub ci ntsa iab ntawm lub caij ntuj sov, tej zaum nws yog lub sijhawm los tso koj lub pipette thiab ntxiv ib lub thawv dej khov rau koj cov qauv kom lub cuab yeej tso cua sov ntau dua. Qhov kev hwm rau qhov kub thiab txias hloov pauv no yog qhov zoo tshaj plaws hauv chav kuaj thaum lub caij ntuj sov kub heev - tom qab tag nrho, nyob rau hauv 40 ° C kub ntawm lub caij ntuj sov, txawm tias molecules xav tau ib qho "cheeb tsam polar dag."