Phau Ntawv Qhia Txog Kev Tshawb Fawb Lub Caij Ntuj Sov: Thaum 40 ° C Thaum Tshav Kub Nroj Tsuag Ua Raws Li Kev Sim Molecular

Cov kub kub tau txuas ntxiv mus thoob plaws ntau ntawm Tuam Tshoj tsis ntev los no. Thaum Lub Xya Hli 24th, Shandong Provincial Meteorological Observatory tau tshaj tawm cov lus ceeb toom kub kub, kwv yees "zoo li sauna" kub ntawm 35-37 ° C (111-133 ° F) thiab 80% av noo rau plaub hnub tom ntej hauv thaj chaw hauv av. Kub hauv qhov chaw xws li Turpan, Xinjiang, nce mus txog 48 ° C (111-133 ° F). Wuhan thiab Xiaogan, Hubei, nyob rau hauv kev ceeb toom txiv kab ntxwv, nrog rau qhov kub siab tshaj 37 ° C hauv qee thaj chaw. Nyob rau hauv lub tshav kub kub no, lub ntiaj teb microscopic hauv qab ntawm cov pipettes muaj kev cuam tshuam txawv txawv - kev ruaj ntseg ntawm nucleic acids, kev ua ntawm enzymes, thiab lub cev lub cev ntawm reagents yog tag nrho ntsiag to distorted los ntawm cua sov.

Nucleic acid extraction tau dhau los ua kev sib tw rau lub sijhawm. Thaum qhov kub ntawm sab nraum zoov tshaj 40 ° C, txawm tias nrog lub tshuab cua txias, qhov kub ntawm lub rooj ua haujlwm feem ntau hovers tshaj 28 ° C. Lub sijhawm no, cov qauv RNA tshuav nyob rau hauv qhov qhib degrade ntau dua ob zaug sai li thaum caij nplooj ntoos hlav thiab caij nplooj zeeg. Nyob rau hauv magnetic hlaws extraction, cov tshuaj tsis yog nyob rau hauv lub zos saturated vim ceev volatilization ntawm cov kuab tshuaj, thiab muaju yog yooj yim precipitated. Cov crystals no yuav ua rau muaj kev hloov pauv loj hauv kev ua haujlwm ntawm nucleic acid capture. Lub volatility ntawm cov kuab tshuaj organic nce ib txhij. Ntawm 30 ° C, tus nqi ntawm chloroform volatilization nce 40% piv rau 25 ° C. Thaum lub sijhawm ua haujlwm, nws yog ib qho tsim nyog los xyuas kom meej tias cua ceev hauv lub hood yog 0.5m / s, thiab siv cov hnab looj tes nitrile kom muaj kev tiv thaiv zoo.

Kev sim PCR ntsib kev kub ntxhov ntau dua. Reagents xws li Taq enzyme thiab thim rov qab transcriptase yog qhov tsis tshua muaj siab rau qhov kub thiab txias tam sim ntawd. Condensation ntawm lub raj phab ntsa tom qab tshem tawm ntawm -20 ° C lub freezer tuaj yeem ua rau ntau dua 15% enzyme kev ua haujlwm poob yog tias nws nkag mus rau hauv cov tshuaj tiv thaiv. dNTP cov kev daws teeb meem kuj tseem tuaj yeem pom qhov degradation degradation tom qab tsuas yog 5 feeb ntawm qhov kub ntawm chav tsev (> 30 ° C). Cov cuab yeej ua haujlwm kuj tseem cuam tshuam los ntawm qhov kub thiab txias. Thaum qhov ntsuas kub ntawm qhov ntsuas kub yog> 35 ° C thiab cov cua kub dissipation clearance ntawm PCR ntsuas tsis txaus (<50 cm ntawm phab ntsa), qhov kub ntawm qhov sib txawv tuaj yeem ncav cuag li 0.8 ° C. Qhov kev sib txawv no tuaj yeem ua rau kom muaj txiaj ntsig zoo ntawm ntug ntawm 96-zoo phaj kom poob ntau dua 40%. Cov plua plav lim yuav tsum tau ntxuav tsis tu ncua (piv txwv li cov plua plav kom txo tau cov cua sov kom zoo li 50%), thiab cov cua txias ncaj qha yuav tsum zam. Tsis tas li ntawd, thaum ua kev sim PCR thaum hmo ntuj, tsis txhob siv PCR ntsuas raws li "makeshift tub yees" khaws cov qauv. Cia ntawm 4 ° C rau ntau tshaj 2 xuab moos tuaj yeem ua rau muaj qhov sib xyaw ua ke tom qab lub hau kub kaw, diluting cov tshuaj tiv thaiv kab mob thiab muaj peev xwm ua rau lub ntsuas ntsuas hlau.

Tau ntsib nrog cov lus ceeb toom kub kub tsis tu ncua, cov chaw kuaj molecular yuav tsum tau suab lub tswb. Cov qauv zoo RNA yuav tsum tau muab khaws cia rau hauv qab ntawm -80 ° C lub freezer, nrog rau kev nkag mus rau lub sijhawm kub. Qhib lub qhov rooj ntawm -20 ° C lub freezer ntau tshaj tsib zaug hauv ib hnub yuav ua rau qhov kub thiab txias hloov pauv. Cov khoom siv hluav taws xob ua kom sov siab yuav tsum muaj tsawg kawg yog 50 cm ntawm qhov chaw tshav kub ntawm ob sab thiab sab nraub qaum. Tsis tas li ntawd, nws raug pom zoo kom rov tsim kho lub sijhawm sim: 7: 00-10: 00 AM rau kev ua haujlwm kub-rhiab xws li RNA extraction thiab qPCR loading; 1:00-4:00 PM rau kev ua haujlwm tsis yog kev sim xws li kev txheeb xyuas cov ntaub ntawv. Cov tswv yim no tuaj yeem tiv thaiv qhov kub siab tshaj plaws los ntawm kev cuam tshuam nrog cov kauj ruam tseem ceeb.

Kev sim tshuaj molecular thaum lub caij cua sov yog qhov kev sim ntawm ob qho tib si cov txheej txheem thiab kev ua siab ntev. Nyob rau hauv lub caij ntuj sov lub caij ntuj sov, tej zaum nws yog lub sij hawm los tso koj cov pipette thiab ntxiv ib lub thawv ntxiv ntawm cov dej khov rau koj cov qauv kom tso cai rau lub twj tso kua mis dissipate ntau cua sov. Qhov kev fij siab rau qhov kev hloov pauv ntawm qhov kub thiab txias yog qhov muaj txiaj ntsig zoo tshaj plaws hauv lub caij ntuj sov lub caij ntuj sov - tom qab tag nrho, hauv 40 ° C thaum lub caij ntuj sov, txawm tias cov molecules yuav tsum tau ua tib zoo saib xyuas "cov khoom siv dag zog."